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一种空气辅助同轴喷射的高通量微凝胶生物制造方法

时间:2024-03-01 08:18 来源:中国机械工程学会增材制造技术( 作者:梁拓、高琳 阅读:
供稿人:梁拓、高琳
供稿单位:西安交通大学机械制造系统工程国家重点实验室
来源:中国机械工程学会增材制造技术(3D打印)分会

        近日,宾夕法尼亚州立大学的研究团队开发了一种简单快速的方法,无需任何复杂或昂贵的耗材和配件,可用于细胞治疗、组织再生和3D生物打印应用的可扩展高通量微凝胶制造。我们利用空气辅助同轴装置(ACAD)来生产含有细胞或无细胞的微凝胶。设备设置具有两个同心布置的独立喷嘴,聚合物溶液和空气通过这些喷嘴流动。为了证明该工艺的多功能性,团队制造了多种材料的微凝胶及其组合,包括海藻酸盐(Alg),GelMA(GelMA)和海藻酸盐-GelMA(Alg-GelMA)微凝胶。之后团队对形成的微凝胶进行了多种应用的测试,包括它们在细胞封装、生物打印(作为直接挤出的生物墨水或作为嵌入式生物打印的支撑浴)和支架中的应用。

(A)实验装置,包括连接到气流的气泵的同轴喷嘴和用于水凝胶流的注射泵(B)使用ACAD器件进行Alg,GelMA和Alg-GelMA凝胶生产微凝胶示意图
图1 微凝胶的高通量制造设备

      团队使用ACAD平台成功制备了Alg,GelMA和Alg-GelMA的球形微凝胶。将前体聚合物溶液在40、60、100和180 kPa的不同压力水平下挤出,并分析了微凝胶的尺寸和形状。使用上述压力水平制备的海藻酸盐、GelMA和海藻酸盐-GelMA微凝胶的明场图像如图2(A)所示。微凝胶呈球形形貌,彼此分离,无可见团聚。通过量化微凝胶的生产率来评估ACAD平台的有效性。与海藻酸盐和海藻酸盐-GelMA微凝胶相比,GelMA微凝胶的生产率显著更高,如图2(B)。海藻酸盐、GelMA和海藻酸盐-GelMA微凝胶的圆度分布范围分别为0.2至1、0.5至1和0.2至1。然而,根据范围的不同,GelMA的圆度被确定为明显高于海藻酸盐和海藻酸盐-GelM。总体而言,大多数Alg和GelMA微凝胶表现出~1的圆度,即完美的圆形,如图2(C)。

(A)海藻酸盐,GelMA和海藻酸盐-GelMA微凝胶在不同气压水平下的显微图像 (B)微凝胶生产率 (C)对生成的微凝胶的圆度进行定量评估
图2 无细胞微凝胶的形态学评估和物理表征

为了举例说明制造微凝胶的实用性,团队展示了三种不同的应用,包括细胞包封,生物打印(微凝胶的直接挤出及其用作支撑浴)和支架。

在第一个应用中,团队演示了细胞包封。将GFP MDA-MB-231细胞与母离子聚合物溶液结合后,生产细胞包封的微凝胶,如图3(A)所示。发现所有三种微凝胶类型中MDA-MB-231细胞在微凝胶中的包封效率约为75%。此外,使用另一种细胞类型HDFs也证实了微凝胶的生物相容性和所提出的策略的可行性。

在第二个应用中,微凝胶被用作基于挤出的生物打印的生物墨水和支撑浴。根据流变特性和初步挤出测试,仅将GelMA微凝胶进一步评估为可打印的生物墨水,因为单独的海藻酸盐和海藻酸盐-GelMA微凝胶不可挤出,因为它们显示出水相分离,不会形成细丝,并导致喷嘴堵塞。悬挂长丝测试表明,GelMA微凝胶具有形成细丝的能力,这是生物打印所必需的,如图3(B)所示。此外,将块状GelMA添加到GelMA微凝胶中显着增加了悬挂长丝的最大长度,从而增加了用于挤出的生物墨水的稳健性。

(A)细胞封装 (B)生物墨水的长丝长度、熔融和可印刷性测试 (C)GelMA微凝胶包封的GFP MDA-MB-231细胞3D生物打印
图3 微凝胶的实用性测试

此外,所提出的方法能够制造3D复杂形状的结构。将MDA-MB-231细胞封装在GelMA微凝胶中,然后将其加入GelMA主体中,所得生物墨水用于海藻酸盐微凝胶作为支撑浴的三冠结构的3D生物打印(图3(C))。生物打印的冠状结构显示出高保真度,即使在去除藻类微凝胶后,中空结构也能保持其完整性而不会塌陷,这表明生物打印结构的结构稳定性。

参考文献:
Pal V, Singh YP, Gupta D, Alioglu MA, Nagamine M, Kim MH, Ozbolat IT. High-throughput microgel biofabrication via air-assisted co-axial jetting for cell encapsulation, 3D bioprinting, and scaffolding applications. Biofabrication. 2023. High-throughput microgel biofabrication via air-assisted co-axial jetting for cell encapsulation, 3D bioprinting, and scaffolding applications - IOPscience

(责任编辑:admin)

weixin
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